Autor(a): Erika Costa Rudiger
Orientador(a): Dra. Ivana Barbosa Suffredini
Data da defesa: 01/02/2021
Resumo:
Introdução:Candida albicans faz parte da microbiota normal e está presente em mucosas do trato digestivo, sistema reprodutor e na boca. Esses microrganismos se tornam patogênicos quando há alterações no mecanismo de defesa, quando há resistência imunológica baixa, ou por alterações em fatores hormonais, causando a candidíase, muitas vezes pela presença de leveduras resistentes a tratamentos convencionais. Por isso, há a necessidade de se introduzir novos fármacos antifúngicos, e a natureza é uma importante fonte de novos produtos. Método: Neste projeto, 2.240 extratos foram pesquisados quanto às suas propriedades antifúngicas, a partir de técnicas de disco difusão em ágar (DDA), microdiluição em caldo (MDC), difusão em bioautografia (DeB) e a toxicidade dos extratos ativos foi verificada pelo ensaio de toxicidade a artêmia (TAS). Resultados: A partir da DDA, foram identificados seis extratos ativos que apresentaram halos de inibição entre 8,32 mm e 14,90 mm (e anfotericina B, halo de inibição de 16,05 mm de diâmetro (anfotericina B>NC>NA>ND≥NE=NB=NF). NA, NB e ND apresentaram atividade inibitória em DeB nos volumes de 2 µL, 5 µL e 10 µL, tomados de uma solução a 100 mg/mL. A concentração fungicida mínima (CFM) mais baixa foi dos extratos NA e NC, que correspondeu ao mesmo valor da anfotericina B, de 3,91x10-2 mg/mL. A toxicidade à artêmia dos extratos selecionados foi NA<NB<ND<NE<NF<NC. Conclusão: Dos 2.240 extratos testados, apenas três, NA, NB e ND apresentaram-se com atividade relevante e baixa toxicidade e serão usados em ensaios futuros para determinação da composição química, com o emprego da bioautografia como método de separação.
Palavras-chave: Candidíase; Disco difusão; Fungicida
Área de Concentração: Patologia Ambiental e Experimental.
Linha de Pesquisa: ECOTOXICOLOGIA E INOVAÇÕES TERAPÊUTICAS
Grupo de Pesquisa da UNIP cadastrado no CNPq: Triagem de plantas brasileiras com atividade antitumoral e Terapêutica medicamentosa aplicada às ciências da saúde.
Autor(a): Renata Larocca Moretti
Orientador(a): Dr. Eduardo Fernandes Bondan
Data da defesa: 12/02/2021
Resumo :
Introdução: A doxorrubicina (DOX) é conhecida por causar prejuízos cognitivos em pacientes submetidos a longos períodos de quimioterapia (déficits conhecidos como chemobrain). Existe, assim, urgente necessidade por estratégias terapêuticas capazes de permitir o retorno dos sobreviventes de câncer a sua prévia qualidade de vida. A curcumina (CUR), pigmento de coloração amarela extraído de rizomas de cúrcuma (Curcuma longa L.), e o resveratrol (RSV), um polifenol natural, possuem atividades antioxidantes e anti-inflamatórias. Objetivo: O objetivo deste estudo foi o de investigar os efeitos comportamentais e morfológicos da administração de CUR e RSV em associação com a DOX, a fim de verificar se tais substâncias podiam aliviar a neurotoxicidade descrita para a DOX. Métodos: Ratos Wistar, machos adultos, foram divididos em 4 grupos: DOX (2,5 mg/kg/semana por 4 semanas, via intraperitoneal - i.p.), DOX+RSV (DOX, 2,5 mg/kg/semana por 4 semanas, i.p.; RSV, 10 mg/kg/dia por 28 dias, gavagem), DOX+CUR (DOX, 2,5 mg/kg/semana por 4 semanas, i.p.; CUR, 100 mg/kg/dia por 28 dias, gavagem) e controle (CTR, solução salina a 0,9%, i.p.). Foram realizadas análises comportamentais (campo aberto e teste de reconhecimento de novos objetos - NORT). Os encéfalos foram coletados e processados para a análise histopatológica pelas técnicas de coloração luxol fast blue e hematoxilina-eosina e imuno-histoquímica para expressão de GFAP (proteína glial fibrilar ácida) em astrócitos e de Iba1 (molécula adaptadora de ligação de cálcio ionizado 1) na micróglia. Resultados: Os ratos injetados com DOX apresentaram comprometimento da memória de curto e longo prazo, como visto no NORT às 3 e 24 horas após a habituação, e aumento da expressão de GFAP e de Iba1, respectivamente, em astrócitos e na micróglia do córtex frontal, hipotálamo e hipocampo. Tais déficits cognitivos foram revertidos pela CUR em ambos os períodos e pelo RSV às 24 horas. A astrogliose e a microgliose induzidas pela DOX foram revertidas pelo RSV, assim como pela CUR. Não foram observados sinais de desmielinização e de perda neuronal em qualquer grupo. Conclusão: Dessa forma, a CUR e o RSV se mostraram capazes de reverter a perda de memória, a astrogliose e a microgliose induzidas pela quimioterapia com DOX.
Palavras-chave: astrócitos; déficit cognitivo; micróglia; proteína glial fibrilar ácida; quimioterapia.
Área de Concentração: Patologia Ambiental e Experimental.
Linha de Pesquisa: Patologia Integrada e Translacional.
Autor(a): Pamela Ferreira De Oliveira
Orientador(a): Dr. José Guilherme Xavier
Data da defesa: 26/02/2021
Resumo:
Introdução: O câncer de bexiga corresponde a cerca de 90% das neoplasias do trato urinário canino, apresentando analogia com a doença na espécie humana, usualmente diagnosticada pelo exame histopatológico. Objetivo: O estudo avalia a contribuição de ferramentas morfométricas e imuno-histoquímicas no diagnóstico de carcinomas uroteliais vesicais em cães, sendo investigadas a área e o perímetro nucleares e a expressão da citoceratina 20 (CK20), p53 e Ki-67 nas células epiteliais das amostras. Métodos: Para tanto, foram avaliadas 25 amostras, 10 não neoplásicas, sendo 5 hígidas e 5 inflamatórias e 15 neoplásicas, todas malignas. Resultados: Houve diferença estatisticamente significante relativa à área e perímetro nucleares das células epiteliais entre amostras não-neoplásicas e neoplásicas (teste T de Student, p< 0,0001). A imunoexpressão de CK20 foi eventual em condições não neoplásicas e ausente em tumores. Como contraponto, a positividade ao p53 foi restrita à população neoplásica. Nesta, houve modificação qualitativa e quantitativa no perfil proliferativo evidenciado pela imunoexpressão mais frequente e topograficamente ampla de Ki-67. Não houve relação entre parâmetros histológicos, como invasão de musculatura e embolização tumoral e padrões de imunomarcação. Conclusão: Em resumo, parâmetros cariométricos e imuno-histoquímicos podem contribuir na caracterização de carcinomas uroteliais vesicais caninos.
Palavras-chave: carcinoma transicional, cariometria, imuno-histoquímica, oncologia veterinária.
Área de Concentração: Patologia Ambiental e Experimental.
Linha de Pesquisa: Ecotoxicologia e inovações terapêuticas.
Autor(a): Karina Eiko Kiataqui
Orientador(a): Dra. Maria Martha Bernardi
Data da defesa: 26/02/2021
Resumo:
Introdução: Estudos utilizando camundongos mutantes equilíbrio (Nox3eqlb), doravante denominado eqlb, induzidos pelo agente químico ENU (N-ethyl-N-nitrosourea) são de grande importância por representarem um novo modelo nas investigações envolvendo distúrbios do sistema nervoso central tais como do sistema vestibular e cerebelo. Estudo anterior sugeriu que os eqlb apresentam menor interação social e agressividade; déficits na memória olfatória e na percepção espacial; aumento da atividade serotoninérgica no córtex frontal e redução do índice por área de astrócitos no colículo superior mesencefálico quando comparados ao seu grupo selvagem BALB/c. Objetivo: Neste trabalho se investigou em fêmeas o comportamento exploratório, o(a) aprendizado/memória, a preferência olfatória, a percepção espacial e a expressão do índice por área de astrócitos no colículo superior do mesencéfalo. Resultados: Os resultados mostraram que, em relação aos camundongos BALB/c, as fêmeas eqlb apresentaram: i) redução na frequência de locomoção em campo aberto na primeira sessão de observação, sem modificações nos demais parâmetros da atividade geral em todas as sessões; ii) habituação à exposição em campo aberto similar aos camundongos BALB/c ; iii) redução no aprendizado/memória no teste de reconhecimento de objeto novo; iv) ausência da percepção do odor aversivo sem alterações na percepção do odor positivo no teste de escolha da preferência ao odor; v) aumento na imobilidade no teste de suspensão da cauda; e vi) redução do índice por área de astrócitos no colículo superior. Conclusão: Os resultados sugerem uma possível relação do déficit da constituição celular do sistema nervoso central nos camundongos eqlb. Portanto, esse genótipo pode ser um importante modelo para o estudo de distúrbios do cerebelo in vivo.
Palavras-chave: Genótipo. Camundongo. ENU. Déficits comportamentais.
Área de Concentração: Patologia Ambiental e Experimental.
Linha de Pesquisa: Patologia Integrada e Translacional.
Autor(a): Felipe Saab Romano
Orientador(a): Dra. Maria Anete Lallo
Data da defesa: 23/03/2021
Resumo:
Introdução: A giardíase, doença causada pelo protozoário Giardia duodenalis, é comum nos animais, incluindo o homem, sendo considerada uma zoonose ocasional, já que existem vários genótipos específicos. Diarreia autolimitante é a manifestação mais comum, mas alguns casos podem evoluir para síndrome de má absorção e até óbito. O tratamento pode ser realizado por meio de diferentes fármacos giardicidas como o metronidazol, o secnidazol e o fenbendazol, contudo, possivelmente existem particularidades quanto a ambiência e ao agente que justificam a eventual ineficiência terapêutica, fato que demanda investigação de alternativas farmacológicas. A nitazoxanida é um antiparasitário de amplo espectro muito empregado nos diferentes parasitismos dos humanos e pouco utilizado em medicina veterinária. Por essa razão, Objetivo: O presente estudo testou a eficácia de nitazoxanida em dose única no tratamento da giardíase em cães. Métodos: Após diagnóstico por exames coproparasitológicos, cinquenta cães com giardíase naturalmente adquirida foram divididos em 2 grupos, vinte e cinco animais tratados com fenbendazol (grupo FBZ, 50 mg/kg ao dia por 3 dias) e vinte e cinco animais tratados com nitazoxanida (grupo NTZ, dose única com 50 mg/kg). Resultados: Os cães do grupo NTZ realizaram exames para análise das funções renal e hepática, antes e depois da terapia. Não foram notadas alterações consistentes com toxicidade hepática ou renal nos exames laboratoriais, embora efeitos colaterais discretos tenham sido exibidos em alguns pacientes. A eficácia da nitazoxanida, de acordo com aspectos clínicos e laboratoriais foi semelhante ao fenbendazol, com poucos efeitos colaterais que comprometam seu uso. Conclusão: Baseado nesses resultados, observou-se que a nitazoxanida em dose única foi eficaz no tratamento de giardíase, como uma alternativa segura contra a infecção de cães com Giardia sp, incluindo casos refratários a outros tratamentos.
Palavras-chave: Giardia; terapia; giardicida; cães; zoonose.
Área de Concentração: Patologia Ambiental e Experimental.
Linha de Pesquisa: Patologia Integrada e Translacional.
Grupo de Pesquisa da UNIP cadastrado no CNPq: Clininfec - Clínica e Doenças Infecciosas Veterinárias.
Autor(a): Marilia Alarcon Nogueira
Orientador(a): Selene Dall' Acqua Coutinho
Data da defesa: 22/06/2021
Resumo:
Introdução: Por sua característica zoonótica, a dermatofitose tem grande importância para a saúde pública. Particularmente, os dermatófitos geofílicos são insuficientemente estudados por serem considerados estritamente oportunistas; entretanto, Nannizzia gypsea (sin. Microsporum gypseum), que é geofílica, tem sido isolada por todo o mundo causando infecções no homem e animais, confirmando o potencial patogênico que os fungos geofílicos apresentam. O sucesso no estabelecimento da infecção pelos dermatófitos depende de varias proteínas e enzimas fúngicas, que são a chave na invasão e utilização do estrato córneo do hospedeiro; portanto, o estudo dos fatores de virulência envolvidos na patogenicidade desses fungos auxiliará na compreensão da epidemiologia das dermatofitoses. Objetivo: O objetivo do presente estudo foi pesquisar a secreção de hemolisinas e das enzimas proteinase, fosfolipase, lipase e gelatinase em cepas de N. gypsea. Métodos: Foram testadas 21 cepas de N. gypsea isoladas do solo de 21 parques do município de São Paulo pela técnica de Vanbreuseghem. A produção das enzimas fosfolipase, proteinase e lipase foi verificada empregando-se placas de Petri com meio sólido contendo o respectivo substrato a ser degradado, respectivamente, gema de ovo, albumina sérica bovina e Tween 20. O teste foi considerado positivo quando ocorreu uma zona clara de degradação ao redor da colônia. Para a verificação da produção da enzima gelatinase foi empregado meio contendo gelatina, o qual foi distribuído em tubos; a semeadura ocorreu em picada e antes da leitura final, os tubos foram refrigerados a 4° C por 30 minutos. O teste foi considerado positivo quando houve liquefação do meio. Na prova da produção de hemolisinas empregou-se base de ágar sangue suplementada com 5% de sangue de carneiro desfibrinado; nesta prova, após a leitura de 14 dias, as placas foram incubadas a 32° C. Em cada um dos testes, após a semeadura, as placas foram incubadas por 14 dias a 25° C, realizando-se leituras aos 5, 7, 10 e 14 dias. Resultados: Todas as 21 cepas de N. gypsea produziram fosfolipase aos 14 dias, gelatinase, a partir de 10 dias, proteinase e lipase, a partir de 7 dias de incubação. Em relação à fosofolipase, a maioria das reações foi fortemente positiva para a produção da enzima. Aos 14 dias a 32° C, se verificou hemólise em 81,0% (17/21) das cepas, sendo 82,4% (14/17) de α-hemólise (hemólises parciais) e 17,6% (3/17) de β-hemólise (hemólise total). Todas as cepas de N. gypsea testadas produziram enzimas e/ou hemolisinas, consideradas fatores de virulência, revelando seu potencial de patogenicidade. Os intervalos de leitura ideais para a produção das enzimas fosfolipase, proteinase, lipase e gelatinase foram, respectivamente, 14, 7, 7 e 10 dias; em relação à atividade hemolítica sugere-se 14 dias com temperatura de 32° C. Conclusão: A presença de N. gypsea, com a produção de fatores de virulência em solos de parques do município de São Paulo, pode representar potencial risco de infecção aos humanos e animais que usufruem desses espaços dedicados ao lazer.
Palavras-chave: Dermatófitos geofílicos; dermatofitose; enzimas; hemolisinas.
Área de Concentração: Patologia Ambiental e Experimental.
Linha de Pesquisa: Patologia Integrada e Translacional.
Grupo de Pesquisa da UNIP cadastrado no CNPq: Clininfec - Clínica e Doenças Infecciosas Veterinárias.
Autor(a): Alex de Camargo Coque
Orientador(a): Dr. Paulo Ricardo Dell'Armelina Rocha
Data da defesa: 28/06/2021
Resumo:
Introdução: Listeria monocytogenes é uma bactéria que pode ser encontrada em diversos locais relacionados ao ambiente rural e é a principal causadora da listeriose. É uma doença relevante na atualidade, causadora de prejuízos à indústria alimentícia e ao consumidor dada à gravidade do quadro clínico e sintomas comuns a outras doenças, e com acentuada subnotificação. No Brasil, até o momento, poucos estudos de biologia molecular foram realizados para avaliar a detecção desta bactéria em propriedades rurais, que tem sido classificada como potencial reservatório de cepas patogênicas. Métodos: No presente estudo, foram colhidas 31 amostras de locais relacionados ao ambiente rural, que foram posteriormente isoladas em meios de cultivo seletivo para Listeria spp.. Em seguida, as amostras foram submetidas ao ensaio de reação em cadeia de polimerase (PCR) multiplex, para caracterização das espécies e principais sorotipos de Listeria monocytogenes. Além disso, as amostras foram submetidas ao teste de susceptibilidade e resistência a antimicrobianos. Resultados: O isolamento microbiológico detectou bactérias do gênero Listeria spp. em 29 amostras. O resultado do teste de disco-difusão demonstrou que várias amostras testadas foram multi-resistentes aos antibióticos amoxicilina, ampicilina, ciprofloxacina, eritromicina, canamicina e tetraciclina, o que é incomum ao gênero Listeria spp.. Entretanto, todas as amostras foram sensíveis ao antibiótico gentamicina. Ainda, o ensaio de PCR detectou oito amostras que foram confirmadas como gênero Listeria spp., e oito amostras positivas nos meios seletivos pertenceram aos sorotipos de Listeria monocytogenenes 1/2a e 1/2b. Estes sorotipos têm sido frequentemente associados a surtos de listeriose em humanos e animais e podem ser encontrados em alimentos de origem animal, além de acometer ruminantes e outros animais. Considerando a resistência aos antimicrobianos de ampla utilização observada no presente estudo, associada à detecção de sorotipos potencialmente virulentos, sugerimos a padronização da caracterização molecular da Listeria monocytogenes e adoção de novas normas sanitárias no Brasil.
Palavras-chave: Listeriose, antibiograma, Zona Rural, sorotipo, 1/2a, 1/2b, Listeria monocytogenes.
Área de Concentração: Patologia Ambiental e Experimental.
Linha de Pesquisa: Patologia Integrada e Translacional.
Autor(a): Priscila Inhauser Baltuille Do Prado
Orientador(a): Dra. Elizabeth Cristina Perez Hurtado
Data da defesa: 30/08/2021
Resumo:
Introdução: O melanoma é responsável pela maioria das mortes por câncer de pele, tendo alto potencial metastático, tratamento difícil e prognóstico reservado. O extrato de Viscum album (VA) é usado como terapia complementar no tratamento de pacientes oncológicos, com efeitos citotóxicos in vitro e in vivo sobre diversos tipos tumorais. No entanto, os efeitos e mecanismos de ação de preparações homeopáticas ultradiluídas do VA precisam ser melhor compreendidos. Objetivo: Assim, verificamos in vitro a ação de ultradiluições de VA em diferentes escalas de potência sobre células de melanoma murino. Métodos: Para a etapa I, tinturas mães de VA coletadas das árvores Abies alba e Quercus robur, tanto no verão quanto no inverno, foram ultradiluídas nas escalas decimal (D), centesimal (CH) e cinquenta-milesimal (LM) e em seguida submetidas a sucussão mecânica. Células de melanoma murino B16F10 foram tratadas com tintura mãe ou potências de VA na 3D, 12D, 30D, 6CH, 12CH, 200CH, 2LM, 3LM ou 5LM por 1, 24, 48, e 72 horas de incubação para análises de citotoxicidade pelos ensaios de brometo 3-(4,5-dimetil-tiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazólio (MTT), Cristal Violeta (atividade mitocondrial e viabilidade celular, respectivamente), avaliação de marcadores de morte por apoptose (Anexina) ou necrose (7AAD), produção de espécies reativas de oxigênio (DCFH-DA), citocinas do perfil inflamatório (IFN-γ, TNF, IL-10, IL-6, MCP-1, IL-12p-70), e os efeitos na morfologia celular e capacidade migratória destas células tumorais após cada tratamento. Resultado: As tinturas mães de VA causaram morte das células B16F10 por necrose principalmente, com resultados similares ao do tratamento com Carboplatina. As diluições homeopáticas tiveram resultados variados, porém, com efeitos de modulação de metabolismo e viabilidade celular, aumento de necrose, redução do estresse oxidativo e diminuição da migração celular.
Palavras-chave: câncer de pele, medicina complementar, Abies alba, Quercus robur, ultradiluições.
Área de Concentração: Patologia Ambiental e Experimental.
Linha de Pesquisa: Ecotoxicologia e Inovações Terapêuticas.
Grupo de Pesquisa da UNIP cadastrado no CNPq: Biologia da diferenciação e transformação celulares: modulação por fatores endógenos e exógenos.
Autor(a): Cristiane Silva Dos Santos Angelon
Orientador(a): Dra. Selene Dall’Acqua Coutinho
Data da defesa: 13/12/2021
Resumo:
Introdução: A pandemia causada pela Covid-19 determinou longos períodos de isolamento e distanciamento social, assim como incertezas quanto ao futuro, gerando grande abalo emocional nas pessoas e contribuindo para transtornos mentais. Poucos são os levantamentos realizados no mundo sobre os efeitos da pandemia no médico veterinário, não se conhecendo pesquisas nessa área no Brasil. Objetivo: O objetivo do presente trabalho foi avaliar o impacto da pandemia de Covid-19 em aspectos profissionais e pessoais de médicos veterinários. Métodos: Foi disponibilizado, em diferentes mídias sociais, um link para que os médicos veterinários respondessem on-line a um questionário contendo questões que visavam entender aspectos demográficos, da prática da medicina veterinária e questões relativas à Covid-19. Aspectos psicológicos foram avaliados pelos Inventários de Ansiedade e Depressão Beck. Participaram do estudo 103 pessoas, sendo 77,7% (80/103) mulheres e 22,3% (23/103) homens, com predomínio de idades entre 30 e 49 anos (71/103 – 68,9%). Os filhos/enteados(as) se encontravam junto com 39,8% (41/103) dos participantes durante a pandemia e a sua presença impactou mais as atividades profissionais das mulheres (13/31 – 41,9%), em relação aos homens (1/9 – 11,1%). Profissionais de ambos os sexos notaram alteração no número de casos clínicos e cirúrgicos atendidos, ocorrendo tanto aumento de 36,3% (37/102), como diminuição de 36,3% (37/102) dos casos clínicos atendidos e 30,1% (31/103) de diminuição das cirurgias. Número significativo de médicos veterinários (78/102 – 76,5%) tiveram dificuldades em adquirir insumos durante a pandemia e 52,4% (54/103) relataram que a pandemia produziu impacto econômico em sua vida. Em relação à presença da doença, 19,4% (20/103) dos participantes tiveram Covid-19 e mais da metade (55/103 – 53,4%) teve alguém de seu relacionamento que veio a óbito devido à doença. Não obstante o sexo, 76,7% (79/103) dos participantes perceberam influência da pandemia em seu estado emocional geral. Verificou-se que 27,2% (28/103) dos participantes apresentaram ansiedade moderada/alta e 72,8% (75/103) ansiedade baixa, sem diferença entre os gêneros. Os resultados indicaram que 48,5% (50/103) apresentaram quadro saudável e 51,5% (53/103) apresentaram quadro depressivo, que variou de leve a severo, sendo mais prevalente na população feminina (44/80 – 55,0%). Conclusão: A pandemia de Covid-19 impactou negativamente a vida dos médicos veterinários, tanto suas atividades profissionais, como aspectos pessoais e psicológicos. Verificaram-se sintomas de ansiedade e depressão nos participantes do estudo, mais frequentes e intensos nas mulheres.
Palavras-chave: COVID-19; Pandemia; Médico Veterinário; Ansiedade; Depressão.
Área de Concentração: Patologia Ambiental e Experimental.
Linha de Pesquisa: Patologia Integrada e Translacional.
